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SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)图片
产品货号:
WE0287
中文名称:
SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)
英文名称:
SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)
产品规格:
500ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品为配制SDS-PAGE分离胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。




组分规格
SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)500mL
说明书1份

保存:2~8℃。


根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
  • 灌制分离胶
    各试剂使用量请参考附表2
    • 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
    • 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
    • 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
    • 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的水层,使凝胶表面保持平整。
    • 静置30~60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
  • 灌制浓缩胶
    各试剂使用量请参考附表3
    • 去除覆盖在分离胶上的水层。
    • 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
    • 加入10%过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
    • 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
    • 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
    • 静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
    • 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
    • 进行常规电泳操作。



附表1.SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围
6%胶50~150kD
8%胶30~90kD
10%胶20~80kD
12%胶12~60kD
15%胶10~40kD


附表2.配制SDS-PAGE分离胶
分离胶浓度凝胶体积所需各组分体积(单位:ml)
纯水30%Acr-Bis(29:1)分离胶缓冲液(4×)10%APSTEMED
6%5mL2.751.01.250.050.004
10mL5.52.02.50.10.008
15mL8.253.03.750.150.012
20mL114.050.20.016
8%5mL2.421.331.250.050.003
10mL4.82.72.50.10.006
15mL7.254.03.750.150.009
20mL9.75.350.20.012
10%5mL2.081.671.250.050.002
10mL4.173.332.50.10.004
15mL6.255.03.750.150.006
20mL8.36.750.20.008
12%5mL1.752.01.250.050.002
10mL3.54.02.50.10.004
15mL5.256.03.750.150.006
20mL7.08.050.20.008
15%5mL1.252.51.250.050.002
10mL2.55.02.50.10.004
15mL3.757.53.750.150.006
20mL510.050.20.008


附表3.配制5%SDS-PAGE浓缩胶
凝胶体积所需各组分体积(单位:ml)
纯水30%Acr-Bis(29:1)浓缩胶缓冲液(4×)10%APSTEMED
2mL1.140.340.50.020.002
4mL2.280.6810.040.004
6mL3.421.021.50.060.006
8mL4.561.3620.080.008

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